基本知识
1. 液体培养基储存于4 oC 冰箱,避免光照,实验进行前放在37度水槽中温热。
2. 液体培养基(加血清) 寄存期为六个月,期间glutamine 可能会分化,若细胞成长欠安,可以再增加适量glutamine。
制造参数
粉末培养基制造(以1 升为例):
1. 细胞培养基通常须增加10 % 血清,因而粉末培养基之制造体积为900 ml,pH 为 7.2 - 7.4。NaHCO3 为其他增加,若将NaHCO3 粉末直接参与液体培养基中会构成 pH 之过失,或部分过碱。因而粉末培养基及NaHCO3 粉末应分别溶解后才混合,然后用CO2 气体调整pH,而非用强酸(HCl)或强碱(NaOH),由于氯离子对细胞成长可能有影响,且储存时培养基的pH 易发作改动。
2. 资料:
1. 纯水(milli-Q 水或二次至三次蒸馏水,水质量非常重要)
2 粉末培养基
3 NaHCO3 (Sigma S-4019)
4 电磁搅拌器
5 无菌血清瓶
6. 0.1 或0.2 mm无菌过滤膜
7. pH meter
8. 真空帮浦
9. CO2 气体
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