大公开:讲解ELISA实验的加样原理

  ELISA是免疫学中常用检测办法，在ELISA试验进程中加样也是极为重要的步骤之一。今日，酶联生物将为广大科研朋友解说ELISA试剂盒试验加样的原理，以供咱们参阅：
正确的加样办法应为45度，吸头贴着孔壁参加，应留意视点太小，会使液体残留在孔壁上，导致加样不精确；吸头应当贴着管壁和液面的交界处！
要留意防止呈现严峻溶血。血红蛋白中含有血红素基团，其有相似过氧化物的活性，因此，在以HRP为标记酶的ELISA测定中，如血清标本中血红蛋白浓度较高，则其就很容易在温育进程中吸附于固相，然后与后边参加的HRP底物反响显色。
血清标本如是以无菌操作别离，则可以在2～8 ℃下保存一周，如为有菌操作，则主张冰冻保存。样本的长时间保存，应在-70 ℃以下。样本的收集及血清别离中要留意尽量防止细菌污染，一则细菌的成长，其所排泄的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白发生分化效果；二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定办法发生非特异性干扰。标本在保存中如呈现细菌污染所形成的的混浊或絮状物时，应离心沉积后取上清检测。冰冻保存的血清标本须留意防止因停电等形成的重复冻融。标本的重复冻融所发生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子发生损坏效果，然后引起假阴性成果。此外，冻融标本的混匀亦应留意，不要进行剧烈振动，重复倒置混匀即可。
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