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腹水样本的采集与保存

腹水采集分成两类:

  1.活着抽取腹水
  2.处死抽取腹水
  活着抽取腹水主要用到的是酒精棉球与注射器(2-5ml) 以及灭后菌的eppendorf管(因为腹水还要分离所以用这个最好,便于离心)。方法就是用酒精棉球擦拭要进针的位置(大概是在腹部中线偏右侧处), 而后先让注射器中留点空气而后进针再将注射器慢慢往后推腹腔中有压力慢慢腹水会往外流,进针时要轻轻下上提一下,感觉无阻碍就好。
  处死抽取腹水就是用止血钳两把,剪刀小号2把,镊子2把即可。 先用剪刀镊子轻轻在小鼠腹腔外皮剪一个小口,而后用两把止血钳轻轻两边拉开,使露出腹部,而后用另一把剪刀镊子剪开内皮,用枪或玻璃直管即可去腹水。也建议放置eppendorf中。
  胸水的采集:
  主要采用胸腔穿刺法收集实验动物的胸水,也可处死实验动物剖开胸腔采集胸水。
  穿刺点定位:
  于实验动物脊侧腋后线第11~12肋间隙穿刺,穿刺针紧贴肋骨上缘,否则容易损伤肋间神经。此部位是肺最下界之外侧,既可避免损伤肺组织造成气胸,又易采集在隔肋窦的胸水。此外,也可在腹侧胸壁近胸骨左侧缘第4~5肋间隙穿刺。
  穿刺方法:
  实验动物取立位或半卧位固定,局部皮肤去毛、消毒、麻醉,穿刺针头与注射器之间接三通连接装置,实验人员以左手拇指、食指绷紧局部皮肤,右手握穿刺针紧*肋骨下缘处垂直进针,穿刺肋间肌时产生一定阻力,当阻力消失有落空感时,说明已刺入胸膜腔,用左手固定穿刺针,打开三通连接装置,缓慢抽取胸水。
  操作中严防空气进入胸腔,始终保持胸腔负压。穿刺应用手控制针头的深度,以防穿刺过深刺伤肺脏。
  建议保存在-80度冰箱。