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原代培育是个很费时刻和精力的进程,期望这样能够使很多人能够少走弯路,节省时刻。脐动脉滑润肌细胞原代培育之贴块法经历共享:
1.要用胎牛血清。开端用的是小牛血清,所以总是不成功,培育基换为DMEM/F12,但后来我又换成DMEM,也培育出来了。-所以作实验特别是新手,刚开端还真得不怕花钱,否则,费时又吃力。
2.把脐动脉剪开很费事,由于它老是打弯,三木提示能够找个软木塞,用大头针固定,后来我找了块木板,由于有磨擦力,所以动脉能够固定在板上。
3.关于新手来讲,zui费事的就是把安排快剪成1mm3小块,能够找块磨砂玻璃,切完再剪就好多了。
4.把剪碎的安排快移到培育瓶里,我用了相似牙科的刮匙,直接放进瓶里。参加2ml培育液,必定不能放多,避免漂浮。然后用玻璃分针悄悄将小块分离开。
其他的根本就按文献就能够了,比方,三个小时后翻瓶,换液时保存1/3。
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