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PCR试剂盒 PCR检测试剂盒 探针法qPCR试剂盒
生化试剂盒 氧化磷酸化系列 植物激素系列 氧化与抗氧化系列 果胶系列 辅酶Ⅱ系列 谷胱甘肽系列 维生素C代谢系列 氮代谢系列 氨基酸代谢系列 酯酶系列 三羧酸循环系列 糖酵解系列 蛋白酶系列 脂肪酸代谢系列 淀粉系列 蔗糖系列 糖代谢系列 P450系列 离子系列 土壤系列 信号系列 其它系列 蛋白含量测定系列 糖异生系列 糖原系列 维生素系列 光合作用系列 辅酶Ⅰ系列 花青素合成系列 乙醛酸循环系列 海藻糖系列
金标检测卡 组织快速检测卡 凉茶快速检测卡 蜂蜜快速检测卡 保化快速检测卡 禽蛋快速检测卡 生鲜乳快速检测卡 理化类以及酶试剂 农药残留快速检测卡 粮油谷物饲料快速检测卡 其他非法添加快速检测卡 动物疫病快速检测卡
技术支持与外包实验 实验外包服务 技术支持 常见问题 脱钙 石蜡包埋 石蜡切片 普通病理染色 免疫组化荧光 切片全景扫描 TUNEL 超微病理 分子病理
动物血清及细胞培养 胎牛血清 其他动物血清 裂解血 小牛血清 新生牛血清 其他同类产品 细胞检测及细胞保护试剂 抗生素及选择性试剂 细胞冻存液 培养基营养添加剂 动物疫苗专用血清 诊断试剂专用血制品 新西兰Bovogen血清
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酶联抗体 一抗 内参抗体 抗体相关支持试剂 标签抗体
二抗 AP标记二抗 Biotin标记二抗 HRP标记二抗 PE标记二抗 荧光标记二抗 其他二抗
细胞系 人细胞系 猪细胞系 猴细胞系 小鼠细胞系 大鼠细胞系 其他细胞系
原代细胞 人原代细胞 大鼠原代细胞 小鼠原代细胞 兔原代细胞 猪原代细胞 其他原代细胞 鸡原代细胞
细胞专用培养基 基础培养基 兔细胞专用培养基 人细胞专用培养基 细胞系专用培养基 小鼠细胞专用培养基 大鼠细胞专用培养基 其他细胞专用培养基 LUC细胞专用培养基 永生化细胞专用培养基
完全培养基 完全培养基 人完全培养基 大鼠完全培养基 小鼠完全培养基 其他完全培养基
细胞库 菌株 细胞株 永生化细胞 耐药细胞株 荧光示踪稳株 luc示踪细胞株 细胞冻存液
病理染色液 HE染色 骨组织染色 碳水化合物染色 固定液 结缔组织染色 脱钙液 酶类染色 细胞染色 植物染色 指示剂 其他染色 微生物染色 核酸染色 金属及盐染色 神经染色 脂类染色 色素染色
生化试剂 氨基酸类 蛋白质类 维生素类 缓冲剂类 培养基类 酶类 碳水化合物类 色素类 植物激素及核酸类 表面活性剂类 其他生化试剂 抗生素类 测试盒类 分离材料及耗材类 其它试剂类 石墨烯所有产品 常见生化试剂
标准品/对照品 中药标准品 对照药材 中检所产品 标准溶液 化学标准品 中国计量院
细胞株 人源性细胞株 小鼠源性细胞株 大鼠源性细胞株 酵母菌 大鼠原代细胞 小鼠原代细胞 人原代细胞 兔原代细胞 其他原代细胞 其他源性细胞株
进口国产培养基 美国药典培养基 化妆品检验培养基 大肠杆菌、大肠菌群 金黄色葡萄球菌检验 消毒灭菌效果评价 临床检验用培养基 中华人民共和国药典 欧洲药典(EP) 饮用天然矿泉水检验方法 微生物检验 肠球菌、链球菌 沙门氏菌、志贺氏菌 弧菌 弯曲杆菌 李斯特氏菌 产气荚膜梭菌 阪崎肠杆菌 乳酸菌、双歧杆菌 小肠结肠炎耶尔森氏菌 一次性试管、液体培养基 乳酸菌检验 菌落总数测定、无菌检验 显色培养基 植物组培
酶标仪 酶标仪 洗板机
细胞培养类 细胞株 动物细胞 人细胞类 细胞分离液 细胞系 品牌细胞 ATCC细胞
英国IDS IDS EILSA剂盒
感受态细胞 表达感受态细胞 发根农杆菌感受态细胞 酵母感受态细胞 根癌农杆菌感受态细胞 克隆感受态细胞
农牧食品残留有害检测 保化快速检测系列 便携综合解决方案 非法添加快检系列 劣质油快筛系列 农残留快检系列 兽残疫病快检系列 微生物快检系列 重金属快检系列
其他试剂盒 其他产品
分子生物学试剂 DNA溶液 RNA溶液 蛋白电泳 蛋白其他 核酸电泳 核酸提取 核酸杂交 酶抑制剂 免疫印迹 核酸其他 分子生物学试剂 蛋白提取与检测
标准溶液 标准溶液 滴定液
常规溶液 抗凝剂 其他溶液 药典溶液
细胞生物学试剂 抗生素 细胞检测 细胞培养 细胞其他 细胞组分分离
免疫学试剂 免疫学试剂
检测试剂盒 生化检测 酶类检测 植物检测 氧化检测
形态病理检测
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酶联产品
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当前位置:首页 > 公司资讯 > 确保ELISA数据质量:关键指标解读

确保ELISA数据质量:关键指标解读

<p>&nbsp;<span style="font-size: 12px;"> &nbsp; &nbsp;ELISA实验常用于检测和定量复杂混合物中的特定蛋白质。结果出来后,需要一定的方法来评估数据是否可靠。主要从以下几个方面进行评估:批内准确度、稀释线性、回收率、灵敏度(检测限)等。</span></p> <div><span style="font-size: 12px;"><br /> </span></div> <h3><span style="font-size: 12px;">&nbsp; &nbsp;&nbsp;</span>批内准确度</h3> <div><span style="font-size: 12px;"><br /> </span></div> <div><span style="font-size: 12px;">&nbsp; &nbsp; 1、批内准确度:通常指测试孔板之间的重复性。变异系数(CV)通常用于评估批内准确度,其值为标准差&sigma;与平均值&micro;的比值。每个样本的%CV通常应小于10%。%CV越大,孔间差异越大,重复性越差,结果也越不可靠。</span></div> <div><span style="font-size: 12px;"><br /> </span></div> <div><span style="font-size: 12px;">&nbsp; &nbsp; 注意:CV值过大可能由以下原因引起:移液不准确。使用前请确保移液器吸头牢固地连接到移液器上,以确保吸取正确的液体量;试剂溅入其他孔中;样品或试剂被细菌或真菌污染;试剂之间交叉污染;酶标板内温度不一致。这可以通过将酶标板置于恒温、远离气流的环境中孵育来避免;有些孔是完全干燥的。​​这需要在孵育过程中始终盖上酶标板的盖子。</span></div> <div><span style="font-size: 12px;"><br /> </span></div> <h3><span style="font-size: 12px;">&nbsp; &nbsp; 稀释线性</span></h3> <div><span style="font-size: 12px;"><br /> </span></div> <div><span style="font-size: 12px;">&nbsp; &nbsp; 稀释线性:稀释线性是指测试样品在不同稀释度下结果的准确度,不同稀释倍数下测定值与精密值的比值应在70%~130%之间。</span></div> <div><span style="font-size: 12px;"><br /> </span></div> <div><span style="font-size: 12px;">&nbsp; &nbsp; 在没有基质干扰的情况下,无论稀释多少,测量值都与真实值一致。当存在基质干扰时,样品稀释会导致基质被稀释,从而导致非特异性结合比例降低,测量值也会随着稀释倍数的变化而发生变化。</span></div> <div><span style="font-size: 12px;"><br /> </span></div> <h3><span style="font-size: 12px;">&nbsp; &nbsp;&nbsp;</span>回收率</h3> <div><span style="font-size: 12px;"><br /> </span></div> <div><span style="font-size: 12px;">&nbsp; &nbsp; 回收率:回收率用于判断目标物质的检测是否受到样品基质差异的影响。例如,待测上清液中含有大量的蛋白质,可能会阻碍抗体结合,导致信噪比升高,导致检测到的目标物质浓度低于实际值。回收率是通过将已知浓度的目标物质加标到不同的样品基质中来确定的。如果平均回收率为80%-120%,则认为样品基质对准确定量分析物检测能力的影响较小。回收率=用基质稀释的目标物质检测值/用基质稀释的目标物质测定值*100%。</span></div> <div><span style="font-size: 12px;"><br /> </span></div> <div><span style="font-size: 12px;">&nbsp; &nbsp; 如果回收率过高或过低,则表明实验体系受到较大的复杂基质干扰。例如,当将1000pg/mL的IL-2加标到空白血清中时,回收率仅为50%,这表明血清中存在干扰因素,影响抗体与IL-2分子的结合。</span></div> <div><span style="font-size: 12px;"><br /> </span></div> <h3><span style="font-size: 12px;">&nbsp; &nbsp; 灵敏度(检测限)</span></h3> <div><span style="font-size: 12px;"><br /> </span></div> <div><span style="font-size: 12px;">&nbsp; &nbsp; 灵敏度(检测限):灵敏度是指能够与背景区分开的最低分析物水平,常被称为分析灵敏度或检测限。一般有三个指标,分别是LOB(最低检测限)、LOD(最低检测限)和LOQ(最低定量限)。LOB(Limitofblank)就是我们通常所说的空白检测限。</span></div> <div>&nbsp;</div> <div><span style="font-size: 12px;">&nbsp; &nbsp; &nbsp;LOB是指使用空白样品,在一定概率下能够测得的最高测量结果。</span></div> <div><span style="font-size: 12px;"><br /> </span></div> <div><span style="font-size: 12px;">&nbsp; &nbsp; LOD(LimitofDetection)就是我们通常所说的检测限,它不使用空白样品进行检测,是在测试低浓度分析物样品时,在一定的概率条件下能够测得的最低值。</span></div> <div><span style="font-size: 12px;"><br /> </span></div> <div><span style="font-size: 12px;">&nbsp; &nbsp; LOQ(LimitofQuantitation)就是我们通常所说的定量限。这也是通过测试低浓度分析物样品得到的一个较低的值。这个值的准确性是有要求的,也就是说,它不仅要能够检测出来,还要保证结果的准确性。打个比方:比如一个物体在远处,随着距离的缩短,你的眼睛从看不见(空白检测限)到看得见(检测限),最后到可以确认是什么物体的程度(定量限)。</span></div> <div><span style="font-size: 12px;"><br /> </span></div> <h3><span style="font-size: 12px;">&nbsp; &nbsp; 信噪比</span></h3> <div><span style="font-size: 12px;"><br /> </span></div> <div><span style="font-size: 12px;">&nbsp; &nbsp; 信噪比(S/N)是信号与噪声的比值,即样品数据与空白数据的比值。一般以信噪比为3:1时对应的浓度或量为检测限,以信噪比为10:1时的量为定量限。</span></div> <div><span style="font-size: 12px;"><br /> </span></div> <div><span style="font-size: 12px;">&nbsp; &nbsp; 总之,评估ELISA实验数据的可靠性需要综合考虑批内精密度、稀释线性、回收率、灵敏度以及信噪比等多个指标。只有当这些指标都符合要求时,才能认为实验结果可靠,并为后续的研究提供有力的支持。良好的实验操作和对这些指标的正确理解和应用,是获得高质量ELISA数据,并最终得出可信结论的关键。如果实验结果不理想,需要仔细检查实验的每个步骤,找出可能存在的问题并进行改进,以确保最终数据的准确性和可靠性。</span></div>