今天与您分享培育基的注意事项

在运用培育基的时候有很多细节是需要注意的，近来，也有不少客户过培育基的相关事宜

我司技术部将培育基的注意事项整理分析如下：

切记，细胞培育基的储存条件是2-8摄氏度。假如细胞培育基不小心被冻，您应该消融培育基并观察是否有沉积发生。假如没有沉积发生，培育基能够正常运用，假如出现沉积，只能丢弃这些培育基。

在进行传代培育时，咱们强烈引荐进行台盼兰活性记数。研究者常常通过一个简单的稀释(1∶4或1∶2)进行传代，不进行活性检测，您或许接种比你认为的低的多的浓度的细胞，这常常或许导致成长缓慢或培育物根本不成长。

储存在4℃冰箱中的液体胰蛋白酶溶液只能运用一周。胰蛋白酶在4℃就或许开端降解，假如在室温下放置超越30分钟，就会变得不稳定。

在订货的细胞抵达后，应立即复苏，假如培育基还没有准备好，可将其放入液氮中，赶快复苏。千万不能放置在-20或-80℃的冰箱内。

细胞复苏往往是比较简单出问题的过程。请在订货细胞时就向供货商索取详细的复苏过程，并仔细阅读。有些供货商就不引荐在复苏时离心，对此类细节，应特别留心。

• 储存在冰箱中的瓶口已开的培育基，或许在放置几天后颜色变紫。这主要是由于在露出到周围的CO2水平常，碳酸氢纳导致了pH值的上升。您能够在运用前松开瓶口，在CO2培育箱孵育培育基10-15分钟，来校对溶液的pH值(确认松开瓶口以保证气体交流)。

当在无血清培育基中添加抗生素时，下降至少在有血清培育基中所运用浓度的50%。血清蛋白会结合和灭活一些抗生素。在无血清培育条件下，抗生素不被灭活，或许对于细胞到达毒性水平。

一旦您在新鲜培育基中添加了血清和抗生素时，您应该在两到三周内运用它。由于一些抗生素和血清中的基本成分在冻结后就开端降解。

大部分添加物和试剂zui多能够冻融3次，假如次数更多都会在包含蛋白的溶液引起一定水平的降解和沉积，将会影响它的性能。

血清的热灭活在免疫分析时能够灭活补体体系。在免疫学研究，培育ES细胞，昆虫细胞平和滑肌细胞时，引荐运用热灭活血清。热灭活是以往公认的操作过程，并没有确凿的依据说明这样做是有利的。相反，对大部分细胞而言，GIBCO和HyClone都不引荐热灭活血清。由于加热或许使血清中的沉积增加，使您误以为污染。

如何防止血清中沉积物的发生

1. 冻结血清时，请依照所建议的逐步冻结法(-20℃至4℃至室温)，若血清冻结时改动的温度太大(如-20℃至37℃)，试验显现十分简单发生沉积物。并随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，削减沉积的发生。

2. 请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清会变得混浊，一起血清中许多较不稳定的成分也会因而受到损害，而影响血清的质量。

3. 血清的热灭活十分简单形成沉积物的增多，若非必要，能够无须做此过程。

4. 若有必要做血清的热灭活，请恪守56℃，30分钟的原则，而且随时摇晃均匀。温度过高，时间过久或摇晃不均匀，都会形成沉积物的增多。

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