免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及相对定量的研究。
称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。想要在做完实验评判结果,今天酶联生物教您三种方法,简单易学,方便快捷,一起跟随我司看看吧!
(1)阳性着色细胞计数法。
在40光镜下,随机选择不重叠的10个视野,人工或机器计数阳性着色细胞,每组3~6张不同动物组织切片,然后进行组间比较即可。
(2)灰密度分析法。
通过在不同组别和不同动物组织切片上选择相同区域、相同条件下用image j进行灰密度分析,然后进行统计分析即可。
(3)评分法。
通过在光学显微镜下对组织切片分别按染色程度(0~3分为阴性着色、淡黄色、浅褐色、深褐色)、阳性范围进行评分(1~4分为0~25%、26~50%、51~75%、76~100%),终了时可以分数相加,再进行比较。
对于以上这几种方法,各有利弊,请细心选择。要想得到正确结果的前提是您要做出着色均匀、背景很浅的高质量切片。
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